1、PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值 自然PDA培养基的配制称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。

(资料图)

2、土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

4、加热溶解 把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。

5、分装 按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。

8、加棉塞 培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。

9、包扎 加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

10、棉塞制作说明棉塞的作用：一是防止杂菌污染;二是可过滤空气，保证通气良好，并可减缓培养基水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。

11、正确的棉塞是形状、大小，松紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适合。

12、过紧则妨碍空气流通，操作不便;过松时，空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中，达不到灭菌的目的。

13、棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。

14、正确的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度的1/3留在试管口外，2/3在试管口内。

15、目前，有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基配制注意事项培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

21、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

22、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。

23、培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。

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